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液相色譜也會“撞鬼”?

更新時(shí)間:2021-02-03      點(diǎn)擊次數(shù):1693
  時(shí)光飛逝,轉(zhuǎn)眼之間2020年只剩下了后兩個(gè)月。今年的萬圣節(jié)剛剛過去,每到萬圣節(jié),孩子們會裝扮成鬼怪的樣子索要糖果,所以人們走在街上時(shí)不時(shí)會“撞鬼”。不僅是大人們會“撞鬼”,液相色譜也會“撞鬼”。
  鬼峰是液相色譜中常出現(xiàn)的問題之一,導(dǎo)致鬼峰出現(xiàn)的因素有很多,在使用液相色譜儀時(shí)任何不當(dāng)?shù)牟僮鞫伎赡軙a(chǎn)生鬼峰,從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。根據(jù)鬼峰出現(xiàn)的頻率判斷,產(chǎn)生鬼峰的主要因素有溶劑問題,儀器問題、流動(dòng)相殘留氣泡以及操作不當(dāng)?shù)取?br /> 
 

一、溶劑問題
 
  1.有機(jī)溶劑
  甲醇制備工藝相較乙腈的制備工藝來說較為簡單,其雜質(zhì)含量也較少。但甲醇紫外吸收范圍比乙腈廣,當(dāng)使用紫外檢測器尤其波長較低時(shí),用甲醇做有機(jī)相會導(dǎo)致漂移太大產(chǎn)生問題。而用作梯度色譜的乙腈質(zhì)量要求較高,采用進(jìn)口梯度色譜乙腈能夠很好的減少鬼峰的出現(xiàn)。而且如果有機(jī)相使用完后未更換新的流動(dòng)相瓶,直接添加補(bǔ)充到舊的流動(dòng)相瓶也有可能會產(chǎn)出鬼峰。
  2.水
  要保證水的“干凈”,避免水中含有較多的雜質(zhì),盡量用HPLC級的純水并且水相要現(xiàn)配現(xiàn)用,避免微生物滋長。
  3.其它試劑
  緩沖鹽、TFA、EDTA等試劑也會對流動(dòng)相造成很大的影響,盡量用純度高的試劑配制流動(dòng)相。
  二、儀器問題
  1.液相的流動(dòng)相管路被污染
  長時(shí)間使用含水量較高的流動(dòng)相(尤其是加入了緩沖鹽),細(xì)菌很容易在管路中滋生,細(xì)菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或是細(xì)胞碎片會造成鬼峰出現(xiàn)。
  2.檢測器樣品殘留
  一些樣品組分在檢測器流通池內(nèi)殘留,從而產(chǎn)生鬼峰的情況,這種情形,需要對流通池進(jìn)行*清洗。
  3.單向閥堵塞
  由于單向閥堵塞而造成系統(tǒng)壓力不穩(wěn),從而產(chǎn)生鬼峰。
  4.色譜柱中組分殘留
  色譜柱可對流動(dòng)相或系統(tǒng)流路內(nèi)的強(qiáng)保留污染組分起到富集作用,在有機(jī)相比例隨梯度程序變化的過程中而被沖洗出來,污染組分殘留會導(dǎo)致鬼峰的出現(xiàn)。
 
 

三、流動(dòng)相殘留氣泡
 
  這種情況下可將流動(dòng)相超聲或鼓He脫除氣泡并打開purge閥,大流速?zèng)_出儀器管路中的氣泡,來減少氣泡引起的鬼峰現(xiàn)象。
  四、操作問題
  1.流動(dòng)相配置過程中受到污染
  主要是盛放流動(dòng)相的容器或是樣品瓶受到污染。這種污染可能來自于洗滌劑、鉻酸洗液或是其他實(shí)驗(yàn)人員用完后的殘留雜質(zhì)。有時(shí)流動(dòng)相容器的塑料蓋碎片都有可能是雜質(zhì)的來源。對于樣品瓶污染情況下的鬼峰,容易排除,僅需要分別將樣品溶解或稀釋用的試劑以及進(jìn)樣小瓶更換,即可確定鬼峰的來源。
  2.樣品稀釋液與流動(dòng)相極性或者pH相差太大
  這也是導(dǎo)致鬼峰的原因之一,這種問題很有可能導(dǎo)致樣品分為兩個(gè)不同的階段出峰,從而產(chǎn)生雙峰或者多峰。
  討論到這里,大家可以看到鬼峰的來源多種多樣的,除了避免實(shí)驗(yàn)操作錯(cuò)誤、溶劑和儀器錯(cuò)誤導(dǎo)致鬼峰出現(xiàn),使用鬼峰捕集柱能大大減少鬼峰的出現(xiàn)。恒譜生鬼峰捕集去除柱也稱鬼峰小柱,將鬼峰捕集柱安裝在梯度混合器和自動(dòng)進(jìn)樣器之間,不僅能夠去除流動(dòng)相中的雜質(zhì),還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。柱芯容積約700μL,耐壓>35Mpa,有多種尺寸、規(guī)格可供選擇。
 
 

  恒譜生科學(xué)儀器有限公司是致力于研發(fā)制造高質(zhì)量色譜耗材配附件的高科技生產(chǎn)廠家,我們在無氣泡較高凈化能力的溶劑進(jìn)樣過濾器、超高壓在線過濾器、較少死體積色譜保護(hù)柱生與卡套、0.1μm高光潔度色譜柱柱管、鬼峰去除柱、管路接頭等領(lǐng)域具有十多年豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和較強(qiáng)大的制造技術(shù)能力。