c18液相色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高，如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加，屬于正?，F(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高，可能的原因有如下幾點：
1、液相色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染；
2、色譜柱頭的填料被樣品污染；
3、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結(jié)晶析出；
4、流動相pH值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。
液相色譜柱解決辦法如下：
1、如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘，重新裝入色譜柱。
2、如確定c18液相色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲。
3、如確定定是鹽結(jié)晶，用10%的甲醇/水沖洗液相色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解，再換高濃度甲醇。
4、如果因pH值使用不當，很難恢復(fù)。
液相色譜柱樣品制備
1、樣品應(yīng)當盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外，如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
2、樣品溶液在進樣前應(yīng)使用針頭式過濾器對樣品預(yù)先過濾。頻繁改變流動相組成，會加速降低柱效。
3、c18液相色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得*分離效果，使用時請不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外最高操作溫度不要超過60℃。
讓色譜分離更有效
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